martes, 6 de julio de 2010

PCR

Hace unos días finalizo en este blog una encuesta en la que se preguntaba en consistía la PCR.
Pues bien, vamos a explicar en esta entrada en que consiste la PCR; pero antes os invito a que participéis en todas las encuestas que se publican en el blog, las cuales al finalizar serán comentadas en entradas (como la de la PCR) y aclaradas.
Hecha esta invitación a la participación en el blog, vamos a aclarar en que consiste la técnica de la PCR. La PCR es una técnica molecular (es la reaccion en cadena de la DNA polimerasa) que se utiliza para la amplificación o colación (crear muchas copias) de una muestra de DNA.
Para llevar a cabo una PCR se necesita un DNA, introducir un gran exceso de dos cebadores (moléculas de RNA) que se unirán al DNA en las regiones de interés delimitando una región de interés, los cuatro nucleótidos [Adenina (A); Guanina (G); Citosina (C); Timina (T)] y la enzima Taq polimerasa que soporta una gran temperatura. La clave es esta Taq polimerasa y la temperatura.
Los pasos a seguir son:
  • Calentamos la mezcla. Así conseguimos desnaturalizar el DNA (separar las dos hebras del DNA)
  • Enfriamos al mezcla  para que los cebadores se unan a las secuencias complementarias flanqueando la región a amplificar.
  • Se deja actuar a la Taq polimerasa la cual copia cada cadena del DNA partiendo desde cada cebador.
  • Así se forma de nuevo DNA de doble cadena pero en este caso  habrá dos DNA de doble cadena.
  • Las hebras se separan elevando la temperatura hasta 95ºC, temperatura a la cual la Taq polimerasa no se desnaturaliza por lo que puede seguir funcionando.
  • Bajamos la temperatura comenzando de nuevo con otro ciclo, pero en este caso con 4 hebras simples de DNA.
Esto se repite varias veces (en el aparato denominado termociclador; figura de la izquierda) consiguiendo que la cantidad de DNA aumente exponencialmente.
Por ejemplo: si el ciclo se repite 20 veces, se amplifica una secuencia concreta hasta un millón de veces.

El la fotografía (fotografia sacada del libro Biologia Molecular y Celular (Lodish) de la 5º edicion)  de abajo se resume todo el proceso de la PCR:


Tambien podeis ver un vídeo donde se explica la PCR.


Cabe mencionar que debido a su importancia, esta técnica se aplica para el diagnostico clínico, para test de paternidad, biología forense, investigación,.......

Para finalizar la entrada, os voy a mostrar los resultados de la encuesta:

- ¿En que consiste la PCR? (dos opciones corresctas):


  1. Es la reacción en cadena de la DNA polimerasa ............. 100%
  2. Es una prueba para el colesterol................... 0%
  3. Es la reacción en cadena de la RNA polimerasa................  0%
  4. Es una técnica de muestreo utilizada en zoología............ 33%
  5. Es la amplificación de segmentos de DNA.................... 66%
  6. No existe el término PCR........................ 0%
Como ya habeis comprovado a lo largo de esta entrada, las opciones correctas eran la 1 y la 5.
Enhorabuena a los que hayais acertado y gracias a todos por participar en la encuesta.
Os recuerdo que ya podeis votar en la nueva encuesta:

- ¿Que órgano del cuerpo humano tiene una mayor actividad metabólica?
  1. El riñón.
  2. El cerebro.
  3. El músculo cardiaco.
  4. El hígado.
  5. El músculo esquelético.
  6. El páncreas.
  7. Todos tiene la misma actividad metabolica.
Mucha suete, dentro de unas semanas desvelaremos el organo que tiene más actividad metabolica.

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